2.3.5-氯化三苯基四氮唑(TTC)是脂溶性光敏感复合物,常用于检测种子的生存能力以及检测哺乳动物组织的缺血梗寒。它是呼吸链中吡啶-核苷结构酶系统的质子受体,能与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色。有活力种子胚组织活细胞中的脱氢酶可以将TTC还原成不溶性的红色稳定的三苯基甲腊(TTF),如果胚种死亡或胚种生活力衰退,则不能染色或染色较浅。因此可以根据胚种的染色部位和染色深浅程度来鉴定种子的生活力。
技术参数
1.取待检脑组织样本(一般可麻醉后直接取脑或经生理盐水灌注后取脑),取出后:20℃速冻20~30min,便于切片
2.将待检脑组织切片,一般动物样本层厚0.5~2mm
3.切片入TTCStain(2%),避光浸染25~35min
4.切片入4%多聚甲醛或10%中性福尔马林中固定4~24h
5.吸干组织表面清水,应用IPP等图像分析系统测量脑梗死面积并计算大脑梗死体积